Taller de núcleo

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METODOLOGÍA Y RESULTADOS

ACTIVIDAD PROTEOLÍTICA SOBRE PELÍCULAS FOTOGRÁFICAS:

1.1 Dibujamos 4 círculos en una hoja de papel (carta) y los marcamos como A, B, C y D.

1.2 Tomamos 4 recortes de película fotográfica, pusimos uno en cada círculo dibujado en la hoja y realizamos los tratamientos de la siguiente forma:

Recorte A: 1 gota de agua destilada.

Recorte B: 1 gota de bromelaína.

Recorte C: 1 gota de papaína.

1.3 Dejamos actuar a temperatura ambiente por 2 horas en un lugar libre de flujos de aire y retirado del sitio de trabajo para evitar confusiones accidentales.

1.4 Pasadas las 2 horas, en las cuales desarrollamos los demás experimentos, enjuagamos cada recorte de película fotográfica con agua de la llave, frotando suavemente con los dedos.

1.5 Observamos los resultados y dejamos evidencia gráfica de los mismos.

RESULTADOS:

H2O DESTILADA

BROMELAÍNA

PAPAÍNA

Se pudo observar el efecto del agua en la película fotográfica, afectando sus condiciones físicas, evidenciado esto en una mancha en el papel.

La bromelaína afecto visible y fuertemente la película fotográfica, generando una mancha grande y ocasionando el desprendimiento de los compuestos que le dan forma.

La papaína no afectó la película fotográfica de forma que fuera visiblemente notoria al ojo humano.

Para visualizar de forma más detallada el efecto de cada una de las muestras en la película fotográfica representaremos los mismos en la siguiente gráfica, asignando valores de 0 a 5 al conjunto de efectos, siendo 0 el valor correspondiente al menor efecto presentado y 5 al mayor.

2. ACTIVIDAD PROTEOLÍTICA SOBRE GELATINA COMERCIAL

La gelatina es una proteína derivada de la desnaturalización térmica del colágeno que posee la capacidad de formar geles cuando se le trata con calor (90ºC) y luego se le enfría a 4ºC. Esta capacidad de gelificación se puede eliminar si esta proteína es sometida a degradación por proteólisis catalizada por proteasas.

2.1 Preparamos 4 tubos de ensayo de vidrio de la siguiente forma:

Tubo A: 3 mL de solución de gelatina al 5% + 1mL de agua destilada.

Tubo B: 3 mL de solución de gelatina al 5% + 1mL de bromelaína.

Tubo C: 3 mL de solución de gelatina al 5% + 1mL de papaína.

2.2 Agitamos e incubamos a 37ºC por 15 min, luego a 90ºC por 5 min y finalmente llevamos a la nevera, la intención era llegar a los 4ºC, sin embargo por cuestiones de tiempo y recursos el experimento se realizó sometiendo los tubos a la temperatura del congelador, posterior a la aclaración de la profesora de que en este caso y para este experimento en concreto el someter a temperatura diferente a la establecida en al guía no afectaba nuestros resultados de forma drástica.

2.3 Observamos los resultados, dejamos evidencia gráfica de los mismos y pudimos notar cuál era la diferencia entre las consistencias de las diferentes muestras.

RESULTADOS:

H2O DESTILADA

BROMELAÍNA

PAPAÍNA

La gelatina formó un gel consistente, que resistió la prueba de inversión sin mostrar reacción alguna a la gravedad, visualmente fue evidente la reacción.

En esta muestra la gelatina no mostró resultado alguno ante la bromelaína, que impidió el efecto esperado ante los cambios de temperatura efectuados. Se observó precipitado en el fondo del tubo de la muestra, pero ante el mínimo movimiento de la muestra se observaba como no hubo consistencia de gel y por ende la muestra se desplazaba de un lado al otro según se efectuarán movimientos.

Esta muestra sí mostró consistencia de gel, pero en una forma un poco más débil que la del agua destilada, evidencia de esto fue que al presionar la muestra con un instrumento se mostró blando y suave.

3. ACTIVIDAD PROTEOLÍTICA SOBRE ALBUMINA DE HUEVO:

3.1 Preparamos 4 tubos de ensayo de vidrio de la siguiente forma:

Tubo A: 3 mL de solución de albúmina al 5% + 1mL de agua destilada.

Tubo B: 3 mL de solución de albúmina al 5% + 1mL de bromelaína.

Tubo C: 3 mL de solución de albúmina al 5% + 1mL de papaína.

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3.2 Agitamos e incubamos a 37ºC por 60 min, tapamos los tubos y centrifugamos a 3000 rpm por 5 min, recordando dar un equilibrio con un tubo extra.

3.3 Transferimos 2 mL de sobrenadante de cada tubo a otra serie nueva de 4 tubos limpios.

3.4 Agregamos a cada tubo 1mL de solución de hidróxido de sodio [NaOH] al 40% y 1 mL de solución de sulfato cúprico [CuSO4] al 1% (Reacción de Biuret).

3.5 Observamos los resultados, dejando evidencia gráfica de los mismos.

RESULTADOS:

H2O DESTILADA

BROMELAÍNA

PAPAÍNA

El agua se coloró fuertemente con los compuestos, presentando un color púrpura fuerte.

La bromelaína se coloró mínimamente, siendo de las 3 muestras la que menor reacción tuvo al reactivo de biuret.

A pesar de que su reacción no fue tan fuerte como la del agua, si presentó coloración púrpura.

4. ACTIVIDAD PROTEOLÍTICA SOBRE LECHE:

Las sulfhidril-proteasas como la Bromelaína y la Papaína son capaces de digerir la proteína κ-caseína de la