Vibrionaceae, es una familia de Proteobacteria
Enviado por Helena • 14 de Diciembre de 2017 • 3.343 Palabras (14 Páginas) • 304 Visitas
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Pruebas
Medios de cultivo
Técnica Utilizada
Resultados
Observaciones
Tinción Gram
Directamente de la cepa (sólida)
Frotis sobre un porta objeto, al cual se le agregaron una serie de reactivos para su coloración, luego se observó en el microscopio.
Gram -
Se observaron bacilos largos y cortos, de color rosado.
Acetoína
Voges Proskauer
(RM / VP)
Inoculación con el asa de platino una pequeña cantidad de cepa sólida.
RM : (-)
VP : (+)
Al agregarle el reactivo Rojo de metilo al medio de cultivo, este tuvo una coloración amarilla, indicando que el microorganismo utilizó la glucosa por la vía de Voges Proskauer. Estas pruebas son inversamente proporcionales, es decir, si Rojo de metilo es negativo, Voges Proskauer es positivo.
Oxidación
y Fermentación
Medio Hugh y Leifson: medio de cultivo sin carbohidrato, el cual se fundió y se le agrego a cada tubo 3 gotas de los siguientes azúcares:
.- Glucosa
.- Manitol
.- Arabinosa
Indicador de pH: Rojo fenol.
(+) amarillo
(-) rojo
Se inoculo por medio de un asa de platino parte de la cepa sólida.
Las muestras se realizaron por duplicado para cada azúcar, donde se taparon unos tubos con parafina (para observar la fermentación) y los otros se dejaron sin parafina (se observa la oxidación).
.- Tubos con parafina: todos estaban amarillos (+), indicando fermentación.
.- Tubos sin parafina: todos estaban amarillos (+), indicando Oxidación.
Coloración amarilla en todos los tubos (con parafina y sin parafina). El microorganismo utilizó la glucosa por la vía fermentativa y oxidativa. Después de 24 horas.
Continuación de la tabla #01
Pruebas
Medios de cultivo
Técnica Utilizada
Resultados
Observaciones
Metabolismo
T.S.I (agar hierro triple azucarado)
Picadura en el taco y estría en la pendiente
Glucosa y Sacarosa (+).
Lactosa (-)
El microorganismo no utilizó la lactosa que se encontraba en la pendiente. Pero si utilizó la glucosa y la sacarosa, y produjo acidificación. Manifestándose dicha acidez en el taco y el medio del tubo sin producción de H2S en el medio de cultivo.
Descarboxilación de la Lisina
(L.D.C)
Caldo lisina
Descarboxilasa (LDC)
Se inoculo con un asa de platino parte de la cepa sólida.
(-)
El medio se torno de un color amarillo, indicando que se produjo acidificación.
Prueba de Indol
Caldo triptófano
Se inoculo con un asa de platino parte de la cepa sólida.
(-) color amarillo
No hubo formación de anillo color rojo en la superficie del tubo cuando se le agregó el reactivo de Kowac’s, por lo tanto el microorganismo no fue capaz de desaminar el triptófano hasta la producción del anillo de indol.
Aislamiento
T.C.B.S
(Tiosulfato citrato sales biliares sacarosa)
IpH: azul bromotimol
Siembra por estrías en el agar una vez agregado en la placa y solidificado.
El microorganismo fermento la sacarosa.
Se observaron colonias amarillas.
Análisis y Discusión
En la práctica realizada para demostrar ¿qué especie de la familia Vibrionaceae era la estudiada? se realizaron una serie de pruebas microbiológicas con la finalidad de conocer las características morfológicas, culturales y bioquímicas de los grupos microbianos estudiados. A continuación se presentaran todas y cada una de las pruebas que sirvieron para definir dicho microorganismo:
- Crecimiento a 42ºC:
Para la realización de esta prueba se utilizó como medio de cultivo Caldo nutritivo, observando que el microorganismo no es capaz de resistir una temperatura de 42 ºC, esto se pudo evidenciar porque una vez transcurrido el tiempo de incubación, no se observo crecimiento, es decir, presencia de turbidez en el medio de cultivo.
- Movilidad:
Para la realización de esta prueba se utilizó como medio de cultivo la gelosa manita movilidad, resultando el microorganismo móvil (hubo crecimiento en zonas adyacentes a la picadura), esto debido a que una de las características de este tipo de microorganismo es presentar un flagelo polar que facilitan su locomoción).
- Prueba de Catalasa y Oxidasa:
La catalasa es una enzima inducida por el microorganismo como respuesta a la presencia de compuestos tóxicos que se producen mediante el metabolismo oxidativo.
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