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Determinación de la actividad enzimática de la α – amilasa.

Enviado por   •  18 de Mayo de 2018  •  843 Palabras (4 Páginas)  •  525 Visitas

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Figura 3.Actividad enzimática del α-amilasa con las diferentes concentraciones de sustrato (S1, S2, S3, S4, S5).

[pic 8]

Elaborado por Yasmin Rodríguez

- De las rectas de la gráfica de la figura 2., se puede obtener la pendiente que es equivalente a la actividad enzimática.

Tabla 5. Velocidad a los diferentes tiempos y concentraciones de sustrato

Velocidad de reacción del α-amilasa

Sustrato [p/v]

TIEMPO

5 min

10 min

15 min

0,1

0,07159696

0,04461713

0,04103728

0,25

0,09255217

0,049506679

0,083820833

0,5

0,13498647

0,12398498

0,08498501

0,75

0,189295381

0,154893914

0,110771559

1

0,306644547

0,160656597

0,125090951

Elaborado por Denyss Guilcazo

Tabla 6. Valores de los recíprocos para linealización de Lineweaver-Burk.

TIEMPO

5 min

10 min

15 min

1/S

1/Vo

1/Vo

1/Vo

10

13,9670735

22,4129163

24,3680868

4

10,804717

20,1992947

11,9302083

2

7,40814987

8,06549309

11,766781

1.333

5,28274908

6,45603158

9,02758803

1

3,26110479

6,2244565

7,99418337

Elaborado por Denyss Guilcazo

Figura 4.Gráfica de la linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 5 minutos

[pic 9]

Elaborado por Denyss Guilcazo

Figura 5.Linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 10 minutos.

[pic 10]

Elaborado por Yasmin Rodríguez

Figura 6. Linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 15 minutos.

[pic 11]

Elaborado por Yasmin Rodríguez

CÁLCULOS DE LAS CONSTANTES CINÉTICAS Vmáx y Km EN LA REACCION SOBRE EL α-amilasa

- Para t = 5minutos

Tabla 7. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=5min.

Enzima

Ecuación

Vmàx

Km

α-amilasa

y = 1,0564x + 4,2712

0,2341

0,2473

Elaborado por Bryan Ibáñez

- Para t = 10minutos

Tabla 8. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=10min.

Enzima

Ecuación

Vmàx

Km

α-amilasa

y = 1,8644x + 5,8356

0,1713

0,3194

Elaborado por Bryan Ibáñez

- Para t = 15minutos

Tabla 9. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=15min.

Enzima

Ecuación

Vmàx

Km

α-amilasa

y = 1,7337x + 6,6606

0,1501

0,2602

Elaborado por Bryan Ibáñez

- DISCUSIÓN

- CONCLUSIONES

- Se calculó los parámetros cinéticos Km real de (p/v) y una Vmáx de (p/v) /min, mediante las gráficas de los dobles inversos.

- Se determinó mediante la curva de calibración, un coeficiente

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