Determinacion de proteinas en la leche en polvo

...

Resultados

Tabla 1: Soluciones en los tubos y concentración final

Tubos

0

1

2

3

4

5

Solución patrón 4mg/l

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

Agua

1

0.8

0.6

0.4

0.2

0

Reactivo Biuret

4 ml

4 ml

4 ml

4 ml

4 ml

4 ml

Concentración Final

0 mg/l

0.16 mg/l

0.32 mg/l

0.48 mg/l

0.64 mg/l

0.8 mg/l

Tabla 2: Absorbancia a 540 nm de cada muestra

concentración

lectura

0

0

0.16

0.012

0.32

0.095

0.48

0.109

0.64

0.184

0.8

0.294

[pic 2]

Figura 2: Curva patrón concentración de proteína en la muestra 4.8 mg/l

Tabla 3: Absorbancia a 540 nm muestras de leche

muestras

absorbancia

1

1.898

2

1.944

3

1.27

Promedio 1.704 ± 0.37

OBSERVACIONES

En la práctica realizada se pudo observar, como el cambio de coloración fue diferente en cada uno tenía mayor muestra patrón que el otro y menor cantidad de agua que el otro tubo, también se observó que este tipo de método es muy útil para la determinación de concentración de proteína en la leche. (Juan Roberto Reyes Chávez).

Se observó una coloración violeta en las soluciones de los tubos gracias a la reacción de biuret, la coloración era proporcional a la cantidad de solución patrón que se le añadió. El blanco estaba más claro y el último tubo tenía un color violeta más fuerte.También se observó la absorbancia de cada muestra en el espectrofotómetro, medida a 540nm. (Anahí corral)

En 6 gramos de leche hay 1.38g proteína. Según las disoluciones que hicimos la concentración final de proteínas en la muestra debería ser de 552mg/l estos datos se obtuvieron matemáticamente a través de la ecuación de C1V2= C2V2 (descrita en los anexos). Existe una amplia diferencia entre los datos obtenidos matemáticamente y los datos obtenidos en la práctica.

Adriana estrada

Discusiones

Según la fuente de consulta (Lubet, 2008) la concentración de proteína de la leche es de 23g/L. En la práctica realizada se obtuvo una concentración de 4.8g/L mediante el método Biuret y ayuda del espectrofotómetro; pero al realizar cálculos estequiométricos obtuvimos una concentración de 552mg/L, por lo que nuestros resultados no fueron los más correctos según la fuente de consulta mencionada, los resultados que obtuvimos pudieron ser erróneos, ya sea operacionales en el equipo o al manejar el material de laboratorio o por que los cálculos no se realizaron correctamente. Sin embargo, los resultados obtenidos no concordaron con el mencionado en la fuente de consulta mencionada. (Juan Roberto Reyes Chávez).ç

(Segal, 2005) afirma que en el método de biuret la intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados. El complejo presenta un color violeta característico.

Observamos que la reacción de Biuret fue positiva con la soluciones de los tubos. Por este motivo tomó una coloración violeta indicando la presencia de enlaces peptídicos y por ende la de proteínas. La coloración era proporcional a la cantidad de proteína presente en las muestras. Por esa razón fue más fuerte en el tubo 5 ya que era el que contenía más proteína. En los tubos que contenían la muestra de leche también se identificó un color violeta debido a que la leche es rica en proteínas.

De acuerdo a los resultados finales obtenidos en la determinación de la concentración de proteína en las muestras e leche en polvo la cantidad de proteína es menor a la que se esperaba. Ya que (paladín, 1969) afirma que el contenido de proteína en la leche en polvo debe ser de 23g por cada 100g, y según los cálculos se esperaba 552mg de proteína por litro de disolución, y se obtuvieron 4.8 mg por litro, muy por debajo del resultado esperado. A pesar de eso no se descarta este método de cuantificación