Determinación de la actividad enzimática de la α – amilasa.
Enviado por Ensa05 • 18 de Mayo de 2018 • 843 Palabras (4 Páginas) • 532 Visitas
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Figura 3.Actividad enzimática del α-amilasa con las diferentes concentraciones de sustrato (S1, S2, S3, S4, S5).
[pic 8]
Elaborado por Yasmin Rodríguez
- De las rectas de la gráfica de la figura 2., se puede obtener la pendiente que es equivalente a la actividad enzimática.
Tabla 5. Velocidad a los diferentes tiempos y concentraciones de sustrato
Velocidad de reacción del α-amilasa
Sustrato [p/v]
TIEMPO
5 min
10 min
15 min
0,1
0,07159696
0,04461713
0,04103728
0,25
0,09255217
0,049506679
0,083820833
0,5
0,13498647
0,12398498
0,08498501
0,75
0,189295381
0,154893914
0,110771559
1
0,306644547
0,160656597
0,125090951
Elaborado por Denyss Guilcazo
Tabla 6. Valores de los recíprocos para linealización de Lineweaver-Burk.
TIEMPO
5 min
10 min
15 min
1/S
1/Vo
1/Vo
1/Vo
10
13,9670735
22,4129163
24,3680868
4
10,804717
20,1992947
11,9302083
2
7,40814987
8,06549309
11,766781
1.333
5,28274908
6,45603158
9,02758803
1
3,26110479
6,2244565
7,99418337
Elaborado por Denyss Guilcazo
Figura 4.Gráfica de la linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 5 minutos
[pic 9]
Elaborado por Denyss Guilcazo
Figura 5.Linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 10 minutos.
[pic 10]
Elaborado por Yasmin Rodríguez
Figura 6. Linealización de Lineweaver-Burk para un tiempo de 15 minutos.
[pic 11]
Elaborado por Yasmin Rodríguez
CÁLCULOS DE LAS CONSTANTES CINÉTICAS Vmáx y Km EN LA REACCION SOBRE EL α-amilasa
- Para t = 5minutos
Tabla 7. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=5min.
Enzima
Ecuación
Vmàx
Km
α-amilasa
y = 1,0564x + 4,2712
0,2341
0,2473
Elaborado por Bryan Ibáñez
- Para t = 10minutos
Tabla 8. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=10min.
Enzima
Ecuación
Vmàx
Km
α-amilasa
y = 1,8644x + 5,8356
0,1713
0,3194
Elaborado por Bryan Ibáñez
- Para t = 15minutos
Tabla 9. Constantes cinéticas del α-amilasa para t=15min.
Enzima
Ecuación
Vmàx
Km
α-amilasa
y = 1,7337x + 6,6606
0,1501
0,2602
Elaborado por Bryan Ibáñez
- DISCUSIÓN
- CONCLUSIONES
- Se calculó los parámetros cinéticos Km real de (p/v) y una Vmáx de (p/v) /min, mediante las gráficas de los dobles inversos.
- Se determinó mediante la curva de calibración, un coeficiente
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