El diagnóstico de enfermedades autoinmunes depende de la identificación de síntomas clínicos asociados a la enfermedad y se asocia con la detección de autoanticuerpos

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Los EIE son ampliamente usados para la identificación de AA específicos para antígenos nucleares o citoplasmáticos de diferentes enfermedades órgano-específicas, como la enfermedad de Grave, la cirrosis biliar primaria, la dermatomiositis (DM), o de las sistémicas como esclerosis múltiple (EM), el síndrome de Sjödrem (SjS), la enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC) o la artritis reumatoide (AR).

La ELISA para detectar anticuerpos antinucleares basada en las células HEp-2 (HEp-2 ANA EIA) es un método automatizado con alta reproducibilidad y calibración interna. No obstante, la evaluación de muestras clínicas bien definidas de pacientes con esclerodermia por este método, ofrece menos resultados positivos que la prueba de IFI para ANA

Los inmunoensayos Multiplex

Los inmunoensayos Multiplex permiten la identificación de múltiples AA frente a un determinante antigénico simple de forma simultánea.

Ensayos basados en la tecnología de microarray (microarreglos): los inmunoensayos en tiras de transferencia (line-blot) son inmunoensayos Multiplex que permiten el análisis paralelo de diferentes tipos de AA. Estos usan antígenos recombinantes casi exclusivamente, inmovilizados en líneas rectas sobre una tira de nylon para pruebas, que cuando se incuban con el suero, los AA presentes se enlazan a los autoantígenos en la tira y se visualizan a través de un sistema de detección de color, basado en la actividad de la enzima fosfatasa alcalina. 2

Los resultados se interpretan mediante la comparación de las intensidades del color de la línea de reacción con la del valor de corte, y algunos trabajos publicados sugieren que un pequeño porcentaje de los resultados negativos en la IFI para ANA puede dar positivo en los ensayos en tiras, especialmente para los anti-SS-A/Ro.

La tecnología de microarray planar se desarrolló y aplicó para la detección simultánea de diferentes AA usando el formato de un inmunoensayo tipo sandwich. Los diferentes autoantígenos se inmovilizan en un microarray junto con las proteínas de control. El ensayo se incuba después con el suero del paciente y los AA reaccionantes se detectan gracias a un segundo anticuerpo marcado. La mayoría de los microarrays aplican la quimioluminiscencia o los métodos de fluorescencia para su revelado.

Como alternativa a los microarray planares se está aplicando la citometría de flujo para el análisis de inmunoensayos basados en microesferas. 39 Así surgió hace poco un sistema para la detección de ANA por citometría de flujo, con ventajas en cuanto a ahorro de tiempo y de reactivos por su menor costo. 42

Los sistemas de inmunoensayos con tecnología de micro-esferas y sistemas de detección por citometria de flujo (tecnología xMAP) se están aplicando a la medición de los AA con el uso de microesferas de poliestireno marcadas internamente con diferentes índices de dos fluorocromos diferentes. Cada fluorocromo pude tener cualquiera de los 10 posibles niveles de intensidad de fluorescencia, lo que crea una familia de 100 nichos espectrales en las microesferas, y cada una de las 100 microesferas se pueden diferenciar por la fluorescencia que poseen una vez que los antígenos que corresponden a cada autoanticuerpo se ha unido a ellas y reaccionado con estos. Un rayo laser verde excita a las microesferas y permite cuantificar la intensidad de fluorescencia.

Varias compañías suministran sistemas comerciales basados en la determinación simultánea de AA por citometria de flujo, con buenos resultados en la evaluación de 9 AA diferentes en una misma muestra (ADNdc, SS-A/Ro, SS-B/La, Sm Sm/RNP, Scl-70, Jo-1, ribosoma y centrómero B), 16 pero persiste el problema de una verdadera calibración cuantitativa en la detección de AA de pacientes por las diferentes afinidades de estos AA a los antígenos. 44 No obstante, la principal cuestión sigue siendo si los datos cuantitativos que ofrecen los sistemas Multiplex son comparables o no pueden ser comparados con los que aportan los métodos convencionales, 43 aunque algunos consideran que la sensibilidad, confiabilidad y precisión son similares a los sistemas de ELISA.

Anticuerpos Anti-ENA (anti Ro, La, Sm, RNP, Scl-70, Jo-1)

El término ENA se refiere a “antígenos nucleares extractables”: Ro (SS-A), La(SS-B), Sm, RNP, Scl-70, Jo-1. Estos antígenos se han identificado comoblanco de algunos anticuerpos antinucleares. La búsqueda de anticuerpos específicos contra estos ENAs tiene utilidad en la práctica clínica dadas sus asociaciones con determinadas manifestaciones y enfermedades.Su búsqueda se hace preferentemente mediante ELISA para cada uno de los diferentes antígenos. Este método es de gran sensibilidad y puede detectar concentraciones pequeñas de anticuerpos. Utilidad de la determinación de ENAs en ETC:

LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES ÓRGANO ESPECÍFICAS

Son enfermedades autoinmunes que afectan un determinado órgano y requieren un tratamiento multidiciplinario para brindar un tratamiento multidiciplinario adecudado, mejorando la calidad de vida del paciente.Algunas de estas enfermedades son la Uveítis autoinmune, anemia hemolítica autoinmune, hepatitis autoinmune, colitis ulcerativa crónica, esclerosis múltiple, miastenia gravis, etc.

Se entiende por enfermedad autoinmune a cualquier patología del sistema inmunitario que provoca el ataque a determinadas células sanas del cuerpo.Las causas de ese tipo de enfermedades no son conocidas, aunque se sabe están fuertemente vinculadas a la herencia genética, y se sospecha que también pueden ser causadas por infecciones bacterianas o virales, los efectos de ciertas drogas, toxinas químicas o contaminantes ambientales.Hasta el momento se conocen 80 enfermedades autoinmunes aproximadamente, muchas de ellas con algunos síntomas en común. Su diagnóstico es muy complejo, y su tratamiento suele ser estrictamente sintomático, ya que son enfermedades que no tienen cura.

Los síntomas más comunes de las enfermedades autoinmunes son fatiga, dolores musculares y fiebre; pero el síntoma más típico de una enfermedad autoinmune es la inflamación. Las enfermedades autoinmunes pueden afectar cualquier parte del cuerpo, pero las áreas y tejidos más comunes son: articulaciones y músculos, piel, las células rojas de la sangre, los vasos sanguineos y el tejido conectivo

CAUSAS Y FACTORES DE RIESGO

Determinar las causas de las enfermedades autoinmune es un camino intrincado, actualmente una de las teorías más aceptadas es que el sistema inmune,