PRACTICA - CONCENTRACION DE PARASITOS Y TINCIONES.

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Ritchie

Se agregaron 2mL de formol por 2min, después se agregó éter etílico por 2min y se homogenizó, se giró el tapón del tubo para que saliera el gas, se pasó a centrifugar por 2min a 1500rpm, pasado el tiempo se decantó el liquido y con ayuda de una micro pipeta se agregaron 500microlitros de formol al 5%.

Experimento #2 Tinciones

Temporales

Para estas tinciones se utilizó el método de concentración de Faust. Existen dos tinciones.

Lugol

Se tomó una gota de muestra y se colocó en una gota de lugol sobre un portaobjetos y se cubrió con un cubreobjetos. Y se observó hasta 40X.

AMA (Azul de metileno amortiguado)

Se colocó una gota de muestra en un portaobjetos más una gota de colorante y se cubrió con un cubre objetos. Y se observo hasta 40X.

Permanentes

Para estas tinciones se utilizó el método de concentración de Ritchie. Existen 3 tinciones.

Para la fijación de la muestra se siguió este método.

Se tomó una gota de muestra se extendió sobre el portaobjetos y se dejó secar después se le agregó metanol por 3min pasado el tiempo se retiro el exceso y se dejo secar.

Zielh Neelsen

Después de fijar la muestra, se cubrió con fucsina básica por 10 minutos a generación de vapores, pasado el tiempo se retiró el exceso a chorro de agua, posteriormente se le agregó alcohol acido 30 a 45 segundos y se lavó con agua a chorro medio finalmente se le agregó azul de metileno por 2 minutos, pasado ese tiempo se lavó a chorro de agua y se dejó secar para observarse hasta 100X.

AMA azul de metileno amortiguado

Sobre la muestra previamente fijada se agregó el colorante AMA durante 15 minutos pasado ese tiempo se lavo y se dejo secar para observar a 100X.

Wright

Sobre la muestra previamente fijada se agregó el colorante Wright por 3 minutos, al pasar ese tiempo sin retirar el colorante anterior se añadió el buffer de Wright por 5 minutos, pasado el tiempo se retiró el colorante por decantación y se dejó secar para observar hasta 100X.

Resultados

[pic 2]

Figura1. Tinción temporal AMA se encontró el parasito Giardia Lamblia observado a 40X.

[pic 3]

Figura2. Tinción permanente Wright se encontró Endolimax nana observado a 100X.

[pic 4]

Figura3. Tinción permanente Zielh Neelsen se encontró Blastosistis ominis observado a 100X.

[pic 5]

Figura4. Tinción permanente Zielh Neelsen se encontró Blastosistis ominis observado a 100X.

[pic 6]

Figura5. Tinción permanente AMA Cryptosporidios observados a 100X.

Discusión

Conclusión

Bibliografía