Practica 8. “ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS.
Enviado por Ninoka • 11 de Abril de 2018 • 945 Palabras (4 Páginas) • 403 Visitas
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La luz ultravioleta (UV) empleada para la visualización de ADN a 385 nm de longitud de onda con 8W de potencia ocasiona graves daños oculares y epiteliales, por lo tanto, el investigador deberá contar con una lámina de policarbonato transparente ubicada entre la lámpara y el punto de observación. Además, deberá usar lentes de protección contra rayos UV del mismo material.
El voltaje utilizado para la electroforesis puede generar quemaduras por descarga eléctrica. Aunque la mayoría de cámaras de electroforesis han sido diseñadas para evitar el contacto directo con la electricidad, el operador deberá asegurarse de mantener la fuente poder apogada o desconectada al momento de manipular el equipo.
El proceso de ebullición de las proteínas en baño maría a 100ºC deberá realizarse con extremo cuidado para evitar quemaduras. En este sentido, se recomienda utilizar envases de vidrio resistentes a altas temperaturas (por ejemplo: Pyrex) y gradillas flotantes de polipropileno para colocar los viales.
Resultados:
[pic 1][pic 2]
Fig.2 se puso a hervir la muestra
En baño maria durante 5 min.
Fig.3 se cargó la muestra en
el gel de poliacrilamida.
Conclusión
La muestra del raspado de la mucosa oral pudo correr en la cámara de electroforesis con la ayuda del buffer de carga para proteínas, dichas proteínas emigran hacia debajo de acuerdo a su tamaño aplicando una corriente de voltaje.
Discusión:
La electroforesis nos ayudó a observar los ácidos nucleicos y proteínas a través de la migración de las moléculas a través del gel, en el cual, por acción de un campo eléctrico, fueron separadas de acuerdo a su tamaño o peso molecular. Para controlar el avance de la separación de las moléculas en la matriz y establecer un patrón de fragmentos, las moléculas fueron teñidas para facilitar la visualización de las moléculas a manera de simples en bandas.
¿Cuál es el fundamento de la técnica de electroforesis de proteínas?
R= se forma geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización de las bandas durante un tiempo prolongado. Además tiene la ventaja de que variando la concentración de polímeros, se puede modificar de manera controlada en el tamaño del poro.
¿Qué carga eléctrica poseen las proteínas cargadas en el gel?
R= carga eléctrica negativa.
¿Por qué se debe de hervir la muestra antes de cargarse en el gel?
R= se aplica para desnaturalizar a la proteína.
Referencias:
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/electroforesis.html
K. Aunstrup, in `Applied Biochemestry and Bioengineering ´, ed. L. B. Wingard, E.Katchalski-Katzir, and L. Goldstein, Academic Press, New York, 1979, p. 27.2 P. M
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