Ruta de síntesis de diflubendiamida .

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1.2 3-(1,1-Dimetil-2-metiltioetilimino)-4-yodo-3H-isobenzofuran-1-ona (7)

Anhidrido trifluoroacético (0.76 g, 3.6 mmol) fue añadido a una suspensión de 6 (1.18 g, 3 mmol), en tolueno (10 ml) y la mezcla de reacción fue agitada por 30 min a temperatura ambiente. El solvente fue removido bajo presión reducida para obtener un producto (1.13 g) en una forma cruda cuantitativamente, el cual fue usado sin purificación en la reacción subsecuente. 1H NMR δ (CDCl3): 1.55 (s, 6H), 2.21 (s, 3H), 2.96 (s, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.91 (d, 1H), 8.24 (s, 1H).

1.3 N2-[1,1-dimetil-2-(metiltio)etil]-3-yodo-N1-[2-metil-4-[1,2,2,2-tetrafluoro-1-(trifluorometil)etil]fenil]-1,2-bencendicarboxamida (9)

A una solución preparada con 7 (1.13 g, 3 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le añadió 4-heptafluoroisopropil-2-metilanilina (8)5,6) (0.78 g, 2.85 mmol) y ácido trifluoroacético (0.01 g). La mezcla de reacción fue agitada durante 3 hr. El precipitado obtenido fue colectado por filtración y lavado con pequeñas cantidades de acetonitrilo frío. El redimiento fue de 1.6 g (86%), p.f. 205-206°C. 1H NMR δ (CDCl3): 1.42 (s, 6H), 1.91 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.83 (s, 2H), 6.02 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.99 (d, 1H), 8.47 (d, 1H), 8.50 (s, 1H).

1.4 N2-[1,1-dimetil-2-(metilsulfonil)etil]-3-yodo-N1-[2-metil-4-[1,2,2,2-tetrafluoro-1-(trifluorometil)etil]fenil]-1,2-bencendicarboxamida): Flubendiamida (2)

A una solución de 9 (1.60 g, 2.46 mmol) en diclorometano (10 ml) se añadió MCPBA (0.18 g, mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 3 hr a temperatura ambiente y después se vertió en agua. El producto fue extraído de la fase acuosa con cloroformo. La capa orgánica fue lavada con una solución acuosa de tiosulfato de sodio y una solución acuosa de carbonato de potasio, posteriormente se secó filtrando sobre sulfato de magnesio anhídrido. El solvente fue removido bajo presión reducida y el residuo fue lavado con una solución compuesta de éter y hexano. El rendimiento es de 1.55.g (92%), p.f. 217.5-220.7°C. 1H NMR δ (DMSO-d6): 1.54 (s, 6H), 2.38 (s, 3H), 2.95 (s, 3H), 3.66 (s, 2H), 7.28 (d-d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 8.43 (s, 1H), 9.78 (s, 1H).

La solubilidad de flibendiamida en agua es de 29.9 × 10-6 g/l (20°C), coeficiente de partición logPO/W de 4.20 (24.9±0.1°C).

Los otros derivados fueron sintetizados en una forma similar, y los reactivos y solventes comercialmente disponibles fueron utilizados tal cual. Eñ compuesto trifluorometoxianilina8) para la síntesis del compuesto 21 y el compuesto derivado de monoacetiletilendiamina9) fueron preparados de acuerdo a métodos descritos previamente.

2. Pruebas Biológicas

2.1 Insectos plaga y enemigos naturales

Excepto para la raza resistente a insecticidas de la palomilla dorso de diamante (Plutella xylostela), todos los insectos plaga usados en los ensayos fueron obtenidos de colonias susceptibles mantenidas en el Centro de Investigación de Nihon Nohyaku Co., Ltd. (RCNNC, Kawachi-Nagano, Osaka, Japón). La raza resistente de P. xylostella fue colectada de campos de col en la Prefectura de Osaka en 1998, y mantenida en RCNNC con una selección bimensual aplicando insecticidas comercialmente disponibles tales como ciahalotrina (25 mg i.a./l), teflubenzuron (25 mg i.a./l), metomilo (450 mg i.a./l) y acefato (250 mg i.a./l) hasta la realización de los experimentos. Larvas de segundo o tercer instar de esas especies fueron usadas en las pruebas biológicas para determinar los valores de CL50 (Concentración Letal media o cincuenta: concentración a la cual muere el 50% de los individuos sometidos a la prueba biológica o ensayo) respectivamente, y también se usaron larvas del quinto o sexto instar de Spodoptera litura para comparar los síntomas de las larvas afectadas con aquellos producidos por los insecticidas comerciales.

Enemigos naturales: catarinas (Harmonia axyridis y Coccinella septempunctata bruckii), una avispa parasitoide (Cotesia glomerata)y los ácaros (Pardosa Pseudoannulata y Misumenops tricuspidatus) fueron colectados en el campo experimental del RCNNC. Las avispas parásitos (Encarsia formosa [EN-STRIP®] y Aphiditus colemani [APHIPAR®]), crisopa (Chrysoperla carnea [KAGETAROU®]), La chinche predatora (Orius strigicollis [TAIRIKU®]), la mosquita predatora (Aphidoletes aphidimymyza [APHIDENT®]), y los ácaros predadores (Amblyseius cucumeris [CUCUMERIS®] y Phytoseiulus persimilis [SPIDEX®]), todos comercialmente disponibles.

2.2 Soluciones de flubendamida y de los insecticidas comerciales, y de los otros materiales

En general, las soluciones de flubendiamida fueron preparadas a varias concentraciones para las pruebas diluyendo una formulación de gránulos dispersables en agua (WDG), con de 200 g/kg, en agua conteniendo un agente mojante ( Tokusei-Rinoh®, 300 ml/l). Los diluciones de los productos utilizados como referencia fueron preparadas similarmente con las formas disponibles comercialmente de cihalotrin 50 g/l (Cyhalon®), flufenoxuron 10 g/l (Cascade®), metomilo (Lannate®) y protiofos (Tokuthion®). Se utilizaron de cinco a seis diferentes concentraciones (0.001-1000 mg i.a./l) en cada experimento. Los grupos de control fueron tratados con agua conteniendo el agente mojante. La Rianodina fue suministrada por Sigma-Aldrich Co.

Las soluciones para las pruebas de los compuestos derivados de flubendiamida fueron preparadas de igual manera excepto en el caso de las que se formularon como polvos mojables en lugar de WDG. La formulación WDG de flubendiamida se preparó de la siguiente manera. Flubendiamida (20.7 g) fueron molidos y mezclados con lignina sulfonato de sodio (15 g), dioctilsulfosuccinato de sodio (1 g), tierra diatomea calcinada (20 g) y polvo mineral (43.3 g). La mezcla fue homogenizada y se le agregó agua (30 g). La mezcla húmeda fue amasada y extrusada por medio de un extrusor de gránulos con un tamiz de 0.8 mm de diámetro. Las hebras extrusadas fueron cortadas y secadas para obtener 90 g de la formulación WDG de flubendiamida.

2.3 Método de inmersión de hoja

El método de ensayo por inmersión de hoja fue utilizado para determinar la actividad intrínseca de flubendiamida contra una variedad de insectos lepidópteros, y también fue utilizado para comparar los síntomas que presentan larvas de quinto instar de S. litura con aquellos insecticidas comercialmente disponibles. Se usaron discos de hoja de col (8 cm de diámetro), hojas de té o plántulas de