Taller Técnicas de observación microscópica

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sales de aluminio, cobre, hierro y molibdeno, sal de alumbre, potasio, amonio o hierro.

5. ¿Cuáles son los métodos de coloración?

•Coloración Directa: Afinidad entre el tejido y la sustancia colorante, no se usan mordientes.

•Coloración Indirecta: Emplea mordientes que modifican la acción del colorante.

•Coloración Progresiva: Hace actuar el colorante hasta que alcance el punto óptimo de coloración y mediante un lavado se suspende su acción.

•Coloración Regresiva: Coloración previa más intensa y luego con diferenciadores, elimina su exceso de manera selectiva, hasta lograr la intensidad deseada.

6. Explique una tinción simple y dé un ejemplo

Es en la cual se utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras celulares se tiñen con la misma tonalidad. Las tinciones simples se utilizan para observar la morfología y el agrupamiento celulares y de microorganismos o células.

Ejemplo: Tinción simple positiva (Azul de metileno)

7. Explique una tinción doble y dé un ejemplo.

Son aquellas en las cuales se utilizan varios colorantes combinados. Las estructuras celulares se diferencian en función de los diferentes colorantes que fijan de acuerdo con su propia constitución química. Se utilizan para poner de manifiesto diferencias entre microorganismos, células o parte de ellas.

Ejemplo: Tinción de Hematoxilina – eosina

8. Explique los pasos a seguir para hacer una placa con una muestra microbiológica

Si el producto es líquido, se depositará una pequeña cantidad de material en el centro del porta, extendiéndolo con el asa hasta conseguir una capa fina y homogénea. Si la extensión debe hacerse a partir de un cultivo en medio sólido, la colonia que vayamos a estudiar se mezclará con una gotita de agua destilada estéril o agua salina colocada en el centro del porta.

Luego, secar al aire la preparación. Se puede acelerar calentando ligeramente la parte inferior del porta (sin quemar). Por consiguiente se realiza la fijación de la preparación al portaobjetos, mediante la coagulación rápida de las albúminas citoplasmáticas. Con esto conseguimos que el producto adherido al portaobjetos no sea eliminado, ni vea alteradas sus características morfológicas y estructurales en los procedimientos de tinción posteriores. La fijación puede hacerse por calor suave, pasando el porta sobre una llama o mediante la utilización de placas calefactoras especiales a 37ºC al final se realiza la tinción.

9. ¿Qué es la Hematoxilina?

La Hematoxilina es un colorante vegetal, se extrae del árbol Campeche Se asocia con mordientes para actuar como un colorante básico. Para ser utilizada debe ser oxidada previamente. Los agentes oxidantes pueden ser: el aire (varios meses de exposición) u oxidantes artificiales (óxido de mercurio, permanganato de potasio, dicromato potásico, etc.)

10. ¿Qué es la Eosina?

La Eosina es un colorante artificial, ácido (predomina densidad de carga negativa), por lo cual se asocia y colorea a estructuras catiónicas del citoplasma y matriz extracelular, tales como: filamentos citoplasmáticos (como los de células musculares); membranas intracelulares; y fibras extracelulares.