Trabajo de alimentos extracción de fibra.
Enviado por monto2435 • 18 de Febrero de 2018 • 1.515 Palabras (7 Páginas) • 432 Visitas
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Calcular el contenido celular (material soluble) substrayendo este valor de 100.
Cálculos
- Paredes celulares (%) en “base seca” o “como se ofrece”. 100(((peso del crisol + paredes celulares) - (peso del crisol))/peso de la muestra.
- El porciento del contenido celular se calcula substrayendo de 100 el % de paredes celulares. % contenido celular = 100 - % paredes celulares.
www.fao.org/docrep/field/003/AB489S/AB489S04.htm - 62k
3) Fibra Dietética:
Aunque actualmente el método oficial de la AOAC para la determinación de la fibra dietética es el Método Enzimático Gravimétrico (MEG) de Prosky et al (1985), tambien puede ser determinadad por el método (MEG) de Asp et al (1983) el cual consiste en una digestión enzimática con termamyl (a amilasa termoestable), pepsina y pancreatina donde se obtiene un residuo de fibra dietética soluble (FDS) que contiene las sustancias pécticas, gomas y mucílagos y otro residuo de fibra dietética insuloble (FDI) que contiene las hemicelulosas, celulosa y lignina (Asp et al 1984). La suma de estas dos cifras nos brinda el valor de fibra dietética total (FDT).
DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA TOTAL, METODO ENZIMATICO GRAVIMETRICO
Preparación de la muestra y extracción
Homogeneizar, secar y moler la muestra en un homogenizador. Pasar por un tamiz de malla de 0,3 - 0,5 mm. Extraer con éter de petróleo sí el contenido de grasa es superior al 10 %, tres veces con porciones de 25 mL / g de muestra. Anotar la pérdida de peso por la remoción de la grasa y considerarlo en el cálculo final.
Determinación
Pesar en duplicado alrededor de 1 g de muestra en un vaso de precipitados de 400 mL.
El peso de las muestras no debe diferir en más de 20 mg.
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Agregar 50 mL de tampón fosfato pH 6,0 a cada vaso.
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Controlar el pH y ajustar a pH 6 ± 0,2 si fuese necesario.
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Adicionar 0,1 mL de la solución de α amilasa. Cubrir el matraz con papel aluminio
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Colocarlo en un baño de agua y hervir durante 15 minutos.
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Agitar a intervalos de 5 minutos. El contenido debe llegar a 95 - 100 ºC.
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Enfriar la solución a temperatura ambiente.
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Ajustar pH a 7,5 ±0,2 con aproximadamente 10 mL NaOH 0,275 N.
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Adicionar 5 mg de proteasa. Cubrir el matraz con papel aluminio e incubar 30 minutos a
60 ºC con agitación continúa.
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Enfriar y añadir 10 mL de HCl 0,325 N.
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Medir el pH y agregar gotas de ácido sí fuese necesario. El pH final debe ser
4,0 - 4,6.
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Añadir 0,3 mL amiloglucosidasa, cubrir con papel aluminio e incubar 30 minutos a 60
ºC con agitación continua.
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Adicionar 280 mL de etanol al 95 % precalentado a 60 ºC.
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Dejar precipitar a temperatura ambiente por 60 minutos.
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Pesar el crisol que contiene celite, humedecerlo y redistribuir el celite en el crisol
usando etanol al 78 % y aplicar succión.
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Mantener la succión y transferir cuantitativamente el precipitado al crisol.
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Lavar el residuo sucesivamente con tres porciones de 20 mL de etanol al 78 %, dos
porciones de 10 mL de etanol al 95 % y dos porciones de 10 mL de acetona. El tiempo de filtración y lavado variará de 0,1 a 6 horas.
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Secar el crisol que contiene el residuo durante la noche en estufa de vacío a 70 ºC o en
estufa de aire a 105 ºC.
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Enfriar en desecador y pesar. Restar el peso del crisol y del celite para determinar el
peso del residuo
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Analizar proteínas usando N x 6,25 como factor de conversión en el residuo de una de
las muestras de los duplicados.
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Calcinar el residuo de la segunda muestra del duplicado durante 5 horas a 525 ºC.
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Enfriar en desecador y pesar.
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Restar el peso del crisol y del celite para determinar cenizas
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Efectuar la determinación del blanco en duplicado y en las mismas condiciones
descritas en el procedimiento para el análisis de muestras.
Cálculos
Determinación del blanco:
B = blanco, mg
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