MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA EL PROCESAMIENTO, CORTE, COLORACIÓN Y ARCHIVO DE TEJIDOS HISTOLOGICOS Y CITOLOGÍAS

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Equipo e insumos:

- Lápiz punta diamante

- Laminas portaobjeto

- Canastillas contenedoras de láminas.

Procedimiento:

- Tome el libro de registro y mire el número de muestras matriculadas del día.

- Tome la cantidad de láminas requeridas según el libro de registro.

- Escriba una a una, en las láminas de vidrio con lápiz punta diamante, el año y código de registro según lo establecido en el libro de actas y siguiendo el consecutivo.

- Tome las láminas de vidrio ya rotuladas y póngalas en las canastillas contenedoras.

CORTE, DESPARAFINIZACIÓN Y FIJACIÓN DE TEJIDOS

Definición.

Es la actividad por medio de la cual se toman los tejidos en bloques de parafina, uno a uno y se van cortando en el micrótomo, se recogenen láminas portaobjeto y se llevan al horno para su respectiva eliminación de la parafina y fijación del tejido.

Equipos e insumos:

- Micrótomo.

- Cuchillas desechables de alto y bajo perfil.( se usan de acuerdo al tipo de espécimen)

- Baños de flotación.

- Horno para desparafinización.

- Pinceles de cerda suave.

- Termómetro.

- Agua corriente.

- Gelatina sin sabor.

- Papel periódico.

Procedimiento:

- Llene con agua corriente los baños de flotación, préndalos y prográmelos a una temperatura de 55 – 60 grados centígrados, según la necesidad.

- Adicione al agua la gelatina sin sabor (0.05 grs por 2500 ml).

- Tenga a mano los bloquesen las cubetascon hielo, las láminas, los pinceles, las cuchillas y demás implementos para la tarea de cortar.

- Siéntese para empezar el corte.

- Coloque la cuchilla en el adaptador de cuchillas del micrótomo.

- Revise el angulo de corte y el micraje del micrótomo.

- Tome la primera lámina portaobjetos y el bloque, observe y compare el número de registro en la lámina como el del bloque; asegúrese de que correspondan ambos números.

- Proceda a poner el bloque en el micrótomo para su corte.

- Haga el desbaste del tejido adecuadamente,teniendo en cuenta las especificaciones técnicas.

- Elija el corte óptimo, tómelo con el pincel y póngalo en el baño de flotación.

- Recoja en la lámina portaobjeto el tejido que se encuentra en el baño de flotación y llévelo a la canastilla contenedora.

- Limpie el agua del baño de flotación, de todo residuo de tejido flotante, con una porción de papel periódico definida para tal fin, para evitar y prevenir contaminaciones.

- Proceda de la misma forma con la siguiente placa y bloque hasta terminar con todas las muestras programadas para el corte.

- Una vez termine de cortar lleve las canastillas con las láminas y tejidos cortados al horno para el desparafinado y fijación; deje allí por 30 minutos, a una temperatura máxima de 60 grados centígrados.

- Una vez termine de cortar todas las muestra, recoja y tire los restos de parafina en el recipiente de desechos para tal fin.

- Retire la cuchilla del micrótomo, limpie los restos de parafina del micrótomo, limpie y ordene los demás implementos usados para el corte.

- Recolecte en una caja dedicada para tal fin los bloques cortados, en el orden en que se cortaron y llévelos al área de archivo de bloques.

Recomendaciones:

- Los baños de flotación se deben cambiar diariamente, lavándolos y suministrándoles agua corriente y gelatina, para cada corte programado.

- Los baños de flotación se deben poner a funcionar a primera hora de la mañana, para que el agua con la gelatina a la hora del corte estén a la temperatura optima requerida.

- Se debe monitorear la temperatura de los baños regularmente.

- Se debe observarque los micrótomos estén ajustados y con la angulación apropiada para el corte.

- El corte se debe realizar ente tresy cinco micras, dependiendo de la calidad y características del tejido enviado y de las especificaciones técnicas.

- El desbaste de las muestras se hace de acuerdo al tamaño y conformación del tejido; hay variaciones entre biopsias, quirúrgicas y autopsias.

TINCION DE TEJIDOS

Definición:

Es la actividad mediante la cual se toman las canastillas con láminas y tejidos desparafinados, para su hidratación, coloración y deshidratación, sumergiéndolas en diferentes sustancias químicas y colorantes.

Equipos e insumos:

- Castillo de coloración.

- Alcoholes.(Isopropanol y etanol)

- Xilol.

- Hematoxilina

- Eosina.

- Ácido clorhídrico.

- Hidróxido de amonio.

- Ácido acético.

- Agua corriente.

Procedimiento:

- Saque una canastilla con placas del horno.

- Sumerja la canastilla con placas y agítela dentro del primer recipiente para coloración con Xilol. (Agite unas 20 a 25veces).

- Saque las placas en canastilla escurriéndolas previamente y sumérjalas en el segundo Xilol.

- Sáquela la canastilla con placas, escurra los restos