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MANUAL PROCEDIMIENTOS CEPAIO FCQ 2010

Enviado por   •  6 de Diciembre de 2018  •  5.461 Palabras (22 Páginas)  •  360 Visitas

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Las categorías básicas incluyen forma de la colonia, margen, elevación, color y textura o consistencia:

- Forma: puede ser descrita como circular, irregular o puntiforme (pequeña).

- Tamaño: puede ser una característica útil para la identificación. El diámetro de una colonia representativa puede ser medido. Las colonias muy pequeñas se refieren como “puntiformes”.

- Consistencia: pueden utilizarse varios términos, como seca, húmeda, mucoide y viscosa.

- Color: es importante describir el color o pigmento de la colonia. Debe considerarse que el pigmento puede estar influenciado por factores ambientales tales como temperatura y fuente de nutrientes. Aquí también pueden incluirse algunas características ópticas relevantes como opaca, translúcida, iridiscente, nublada. En el caso de medios de cultivo con un sustrato específico e indicador y de acuerdo a la cepa probada se observa un color por la actividad bioquímica del mismo.

- Elevación: describe la vista lateral de una colonia; incluye plana, levantada, convexa y umbonada (levantada en el centro).

- Margen: puede ser entero (liso, sin irregularidades), lobulado, filamentoso o rizoide (con ramificaciones como una raíz).

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3. Técnicas utilizadas para revisión microscópica de cepas

3.1. Elaboración de un frotis bacteriano.

[pic 2]

(Viramontes y Portillo, 2010)

3.2. Lectura de morfología microscópica:

Para su observación, se toman en cuenta las siguientes formas y agrupaciones:

[pic 3]

(Pommerville, 2004)

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3.3. Técnica para realizar la tinción de Gram

[pic 4]

(Viramontes y Portillo, 2010)

3.4. Técnica para realizar la tinción de cápsulas (Maneval)[pic 5]

(Viramontes y Portillo, 2010)

3.5. Técnica para realizar la tinción de endosporas (Shaeffer y Fulton)[pic 6]

(Viramontes y Portillo, 2010)

3.6. Técnica para realizar la tinción de gránulos metacromáticos (Loeffler)

- Preparar un frotis de la bacteria.

- Cubrir la superficie del extendido con solución de azul de metileno durante 1 minuto.

- Lavar el portaobjeto con agua y secar con papel absorbente.

3.7. Prueba de hidróxido de potasio al 3% para diferenciar cepas Gram (+) y Gram (-)

- Tomar una colonia de la bacteria a probar y ponerla sobre un portaobjetos.

- Adicionarle una gota de hidróxido de potasio al 3% y mezclarla con un palillo de madera.

- Levantar el palillo y observar un hilo viscoso que no se debe romper con facilidad, lo cual indica la presencia de una bacteria Gram negativa.

- Ausencia de viscosidad indica presencia de una bacteria Gram positiva.

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4. Pruebas metabólicas para la revisión de cepas

4.1. Catalasa.

Para detectar la presencia de esta enzima, se coloca una colonia bacteriana (procurando no tocar el agar, sobre todo si es agar sangre), en un portaobjetos limpio, y se le adiciona una gota de peróxido de hidrógeno al 3%.

Resultado

Interpretación

Burbujas

La catalasa está presente

No burbujas

La catalasa está ausente

4.2. Amilasa.

El agar almidón es un medio general (agar nutritivo o agar tripticasa soya) al que se le adiciona almidón al 1%. Después de la incubación (24 h), se añade el reactivo yodo lugol.

Resultado

Interpretación

Zona clara alrededor del crecimiento

La amilasa está presente

No hay zona clara alrededor del crecimiento

La amilasa está ausente

4.3. Ureasa.

Se prepara con 4 mL de caldo de urea en un tubo de ensaye. El medio sin inocular es de color amarillo o anaranjado claro, se inocula y se incuba 24 h.

Resultado

Interpretación

Rosa

Hidrólisis de la urea

Anaranjado o amarillo

No hay hidrólisis de urea; el organismo no produce ureasa o no puede vivir en el caldo

4.4. Coagulasa.

Para realizar esta prueba, se emplea un tubo que contiene plasma y se inocula con la bacteria a probar.

Resultado

Interpretación

Medio sólido

El plasma ha sido coagulado; la coagulasa está presente

Medio líquido

El plasma no ha sido coagulado; la coagulasa no está presente

4.5. Oxidasa.

En esta prueba, las bacterias vivas se colocan

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