Las hormigas medicadas para combatir la enfermedad

...

Una mayor cantidad de ROS en su cuerpo (Paczkowski y

Sch¨utz 2011). En segundo lugar, las hormigas se alimentan de néctar,

Los niveles de ROS también (Carter et al., 2007). En tercer lugar, muchas hormigas han

Interacciones mutualistas con los áfidos, que ellos

Rocío de miel (Offenberg 2001). Como los áfidos se alimentan de plantas, que

Se defienden contra los áfidos con H2O2 (Mai et al., 2013),

Los áfidos o su rocío de miel podrían contener altos niveles de ROS,

Añadiendo otra posibilidad de hormigas para ajustar su consumo de ROS.

Aquí, probamos si las hormigas se medicinan incluyendo

ROS (H2O2) en su dieta utilizando dos configuraciones experimentales

Que nos permitió investigar los cuatro criterios de la automedicación terapéutica.

Demostramos que las hormigas enfermas de hecho participan en este comportamiento Por consumir compuestos tóxicos y, en consecuencia, aumentar su

Supervivencia contra un hongo entomopatógeno generalista, Beauveria

Bassiana

Materiales y métodos

Para dilucidar si ROS aumenta la aptitud del anfitrión en la presencia

De la infección, pero disminuye la aptitud del huésped en ausencia de infección

(Criterios 1 y 2), se recogieron alrededor de 400 hormigas de cada uno de los

30 colonias de la hormiga Formica fusca en Pr astkulla, Finlandia

(Latitud: 59.841969, longitud: 23.201824). Durante 30 días, 15

Las colonias se alimentaron ad libitum con un alimento estándar basado en la miel

(Bhatkar y Whitcomb 1970), mientras que otras 15 colonias

Fueron alimentados con el mismo alimento estándar, esta vez conteniendo 4% de H2O2

(Merck, Darmstadt, Alemania). Posteriormente, 20 hormigas por colonia

Fueron divididos en dos jarras (10 hormigas / jar), y asignados a uno de

Dos tratamientos (control y hongo). Cada hormiga de control fue sumergida

Durante 5 segundos en una solución de Triton - X al 0,05% (Sigma Aldrich, Helsinki,

Finlandia), mientras que las hormigas asignadas al tratamiento del hongo fueron

Sumergido en Triton-X al 0,05% conteniendo 1 × 108 esporas viables / mL

Del hongo entomopatogénico B. bassiana (cepa KVL 03-90).

Posteriormente, las hormigas fueron alimentadas diariamente con sus dietas anteriores (estándar

Alimentos o 4% de alimentos suplementados con H2O2) durante 12 días. La mortalidad fue

Las hormigas registradas y muertas se eliminaron diariamente. Beauveria bassiana

Es un hongo entomopatógeno generalista que se encuentra en Finlandia

(Vanninen 1996). Es el segundo patógeno más común

Hongos en varios tipos de suelo finlandeses (Husberg et al., 1988), y

Comúnmente en los nidos de los congéneres centroeuropeos

Formica selysi (Reber y Chapuisat 2011). Por lo tanto, también F.

Fusca es muy probable que esté expuesto al hongo, aunque esto

No ha sido probado. Sin embargo, como estamos interesados ​​en

Respuestas antifúngicas, utilizamos una cepa danesa para evitar

Locales de influir en el resultado.

Para medir el efecto de la alimentación de H2O2 en el H2O2 real

Concentración en las hormigas, hemos utilizado un Amplex R? Hidrógeno rojo

Kit de ensayo de peróxido / peroxidasa (Invitrogen). Trabajadores de Formica fusca

De cinco colonias se alimentaron durante 48 h en cualquiera de los alimentos de control

O 4% de alimentos suplementados con H2O2. De cada colonia, tres repeticiones

De cuatro hormigas por tratamiento se fijaron en 400 μl de 1 × PBS

Con 3-amino-1,2,4-triazol (2 mg / ml) y el choque se congeló hasta uso posterior. Para la medición de la concentración de H2O2, se

Se permitió al hielo del thawon y se homogeneizó usando un pestle estéril. Los homogenateswere

Centrifugado durante 10 min a 16.000 rpm y el

El sobrenadante se transfirió a un tubo de microcentrífuga limpio. Cincuenta

Microlitros de la muestra se utilizó para el ensayo, y cada muestra

Se realizó como dos réplicas técnicas para corregir la medición

error. El valor medio de las repeticiones se utilizó para estimar

La concentración de H2O2 en la muestra. El ensayo se realizó

De acuerdo con el protocolo del fabricante sobre un Varian Cary Eclipse

Espectrofotómetro de fluorescencia (Agilent Technologies Santa

Clara, CA, EE.UU.). La concentración de H2O2 (en μmol) en las hormigas

Se calculó midiendo primero el volumen de los trabajadores de F. fusca,

Modelado