Lipidos en la yema de huevo.
Enviado por Albert • 9 de Abril de 2018 • 926 Palabras (4 Páginas) • 2.414 Visitas
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4.3591µg/mL (50)=217.955µg/mL
[pic 13]
Valor teorico:
PM: Lecitina=800.2g/mol
800.2g/mol → 31g/mol fosforo
En 0.0098g de lipidos fosforilados pesados→ 3.7965x10 -4g de fosforo
Si 3.7965x10 -4g de fosforo → 100%
Entonces: →57.4094%[pic 14]
[pic 15]
Análisis de resultados:
Como se esperaba los lípidos no fosforilados dieron una absorbancia de 0.001 por lo que se puede decir que contienen una mínima cantidad de fosforo, esto debido a pequeños errores a la hora de separarlos de los lípidos fosforilados al adicionar acetona y filtrar para que los dos tipos de lípidos se separen.
Conforme a la solución estándar de fosfato esta contiene 0.10009g de fosforo y la obtenida experimentalmente de la yema de huevo fue de .[pic 16]
En la cromatografía de capa fina uno de los mayores errores fue la preparación de la placa ya que algunas estaban con partes grumosas y no uniformes lo cual afectó un poco a la hora de eluir las muestras, también la falta de cámaras de elución y el mal acomodo de las placas puesto que estas chocaban con las paredes de vidrio de la cámara, además la concentración de muestra aplicada no era la adecuada pues no hubo claridad en las manchas para el reconocimiento o identificación de los lípidos. Uno de los que se lograron identificar fueron los lípidos neutros que se encuentran casi a la misma altura que el frente del eluyente (véase Cromatografía en capa fina de lípidos).
La mancha más visible en la placa revelada con ninhidrina es la fosfatidiletanolamina lo cual es razonable debido a que la ninhidrina revela fosfolípidos con algún grupo amino (véase imagen Revelador: ninhidrina).
El bismuto es un revelador para fosfolípidos con colina como lo es la fosfatidilcolina y esfingomielina, sin embargo como se mencionó anteriormente la baja concentración de la muestra provocó que no se lograran observar con claridad (véase imagen Revelador: bismuto).
El revelador para fosfolípidos en general es el molibdeno pero nuevamente la falta de muestra provocó que no se pudieran identificar todos, además de que algunas muestras no fosforiladas aparecieran como si tuvieran fosfolípidos, esto debido a que no fueron correctamente separados (véase imagen Revelador: Molibdeno)
Conclusiones:
Al interpolar los datos se obtuvo 4.3591 microgramos/mL matemáticamente y 4.3 microgramos/mL gráficamente
Al realizar los cálculos debidos se obtuvo 2.17955x10^-4g de fosforo.
El cual en comparación con el valor teórico resultó en un 57.4094%.
La baja concentración de la muestra afectó de manera directa la práctica de cromatografía en capa fina ya que no se pudieron identificar completamente los lípidos de la yema de huevo en la placa; el uso de reveladores químicos específicos ayudó mucho a la identificación de los lípidos.
Referencias:
- Manual de Bioquímica Celular y de los Tejidos I. FES Zaragoza. UNAM.
- Murray RK, Bender DA, Botham KM, Herper. Bioquímica ilustrada.28ed.MexicoDF: McGraw-Hill interamericana;2010.
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