DETERMINACION DE PROTEINAS POR METODO DE LOWRY Y BRADFORD
Enviado por tolero • 8 de Junio de 2018 • 980 Palabras (4 Páginas) • 626 Visitas
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Tabla 7. Curva de calibración de albumina. Método de Bradford.
Tubo No.
Cantidad de albumina (μg)
Absorbancia 590
Serie A
Serie B
1
25
0.205
0.210
2
50
0.313
0.314
3
75
0.433
0.455
4
100
0.510
0.525
5
125
0.545
0.559
[pic 3]
- Calcule y escriba los valores de la pendiente, ordenada al origen y el coeficiente de correlación.
m = 0.0036 ordenada al origen= 0.139 R² = 0.9564
- A partir de la recta ajustada por regresión lineal y la ecuación de la misma, obtenga la expresión matemática para calcular la cantidad de proteína.
[pic 4]
ANALISIS ESTADISTICO.
Calcule la media o promedio (x), la desviación estándar (s), la varianza (s2), el coeficiente de variación (CV) y los límites de confianza media (µ), con una confiabilidad del 95%.
Tubo No
A 590
Cantidad de proteína (μg)
1
0.446
85.27
2
0.447
85.55
3
0.500
100.27
4
0.453
87.22
5
0.480
94.72
6
0.450
86.38
7
0.427
80
8
0.430
80.83
9
0.455
87.77
10
0.462
89.72
Tabla 8. Réplicas para el análisis estadístico.
X
S
S2
% c.v
µ
87.77
6.05
36.39
6.89
87.77±4.32
Tabla 9. Réplicas para el análisis estadístico.
EFECTO DE SUSTANCIAS NO PROTEINICAS EN EL METODO DE BRADFORD.
Tabla 10p. Efecto de algunas sustancias no proteínicas en el método de Bradford.
Tubo No.
Sustancia
A590
Cantidad de proteína (µg)
Tipo de interferencia generada
1
Fenol
0.506
101.94
+
2
SDS
0.120
5.27
-
3
(NH4)2SO4
0.505
101.66
-
4
B-Mercaptoetanol
0.506
101.94
-
5
Detergente 1%
0.195
15.55
+
Interprete sus resultados y explique la posible causa de interferencia.
Podemos observar a través de la medición de la absorbancia distintos tipos de interferencia, causados por la transmitancia del aparato, al hacer pasar el haz de luz a través de la muestra, las diferentes sustancias absorben diferentes longitudes de onda lo que causa que nuestra absorbancia se vea afectada y por tanto a la hora de efectuar el cálculo de la cantidad de proteína igual manera.
En este caso la estructura molecular no afecta, ya que este método es independiente de la composición de aminoácidos y proteínas.
DISCUSION.
A
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