Laboratorio de bioquimica. Enzimas
Enviado por Stella • 16 de Marzo de 2018 • 1.984 Palabras (8 Páginas) • 584 Visitas
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En un tubo de ensayo se junta 4 ml de amilasa salival, se experimentan en dos tubos enumerándolos del uno al dos para así poder distinguirlos. A ambos tubos se le agrega 1 ml de amilasa salival y 5 ml de almidón al 1%; luego se agitan durante dos minutos para que quede una mescla homogénea. Luego de tener esta mezcla recurrimos a baño maría para así obtener las temperaturas requeridas que son 37° y 70°.
Al obtener la temperatura requerida, al tuvo de 37° se le agregan 3 gotas de yodo y observamos que tiene un cambio de color transparente a un color purpura oscuro y el tubo de 70° cambia de una color transparente a un color azul oscuro, luego de esto para ambos tubos repetimos el procedimiento de baño maría durante 3 minutos.
Transcurridos los 3 minutos de baño maría se vuelve a agregar 3 gotas de yodo y observamos el cambio se color. El tubo de 37° pasa de color púrpura oscuro a morado azulado oscuro mientras que al tuvo de 70° cambia de un color azul oscuro a azul transparente y nuevamente repetimos el procedimiento de baño maría durante 3 minutos, después de esto agregamos 3 gotas de yodo y el cambio es el siguiente: tuvo de 37° no ocurre ningún cambio mientras que el tubo de 70° tiene un color azul negros. Repetimos el procedimiento de baño maría durante 3 minutos y finalmente el resultado obtenido es tuvo de 37° no ocurre ningún cambio y el tubo de 70° se obtiene un color celeste transparente.
Se toman dos tubos nuevamente son enumerados del 3 al 4, se agregan 1 ml de amilasa salival y 5 ml de almidón al 1 %, se mesclan hasta quedar una mezcla homogénea, se le agrega al tuvo N°3 y tuvo N°4 3 gotas de yodo, el tubo N°3 que estaba a temperatura de 0° tiene un cambio trasparente a un tono azul, al tubo N°4 el que estaba a temperatura ambiente al agregarle 3 gotas de yodo tiene un cambio de color trasparente a un color azul y morado oscuro, al transcurso de 3 minutos se le vuelve agregar 3 gotas de yodo nuevamente, en el tubo N°3 no tiene cambio de ningún tipo de cambio, en el tubo N°4 al agregarle 3 gotas de yodo tiene nuevamente un cambio de color; a un color morado oscuro, en el Benedict en el tubo nº 3 tiene una reacción a trasparente la enzima catalizo la proteína, en cambio al tubo nº 4 no produjo cambio en la mezcla quedando del mismo color.
TABLA DE RESULTADOS
Resultados:
Tubo
Temperatura
0 min
3 min
6 min
9 min
Benedict
Nº 1
37ºC
+
+
-
+
+
Nº 2
70ºC
+
+
+
-
-
Nº 3
0ºC
+
+
-
+
+
Nº 4
Tº Ambiente
+
+
-
-
-
Experimento N°2: Efecto del pH
- Materiales
- Tubos de ensayos
- Solución saliva 1:9
- Solución buffer (pH 2.5, pH 5.4, Buffer pH 6.0, Buffer pH 6.8, Buffer pH 7.4, Buffer pH 8.0, Buffer pH 10.0.)
- Incubadora
- Almidón al 2%
- Solución de Benedict
- Cronometro
Procedimiento
Primero que todo agregamos 1.5 ml de solución salival 1:9 a cada tubo de ensayo, luego se añadió a cada tubo 3 ml de la solución buffer correspondiente
Tubo Nº 1: Sol. Buffer pH 2.5
Tubo Nº 2: Sol. Buffer pH 5.4.
Tubo Nº 3: Sol. Buffer pH 6.0
Tubo Nº 4: Sol. Buffer pH 6.8
Tubo Nº 5: Sol. Buffer pH 7.4
Tubo Nº 6: Sol. Buffer pH 8.0
Tubo Nº 7: Sol. Buffer pH 10.0
Luego de haber realizado esto, lo llevamos a la incubadora en la cual permanecieron hasta alcanzar una temperatura de 37° C. Al retirarlos no logramos observar cambios físicos en los tubos.
Agregamos a cada tubo 5 ml de almidón al 2% procurando que la temperatura no disminuyera para conservar la actividad enzimática. Luego de la aplicación tampoco se observaron cambios físicos.
Seguimos a realizar la prueba de yodo de los cuales obtuvimos los siguientes resultados:
Resultados:
Tubo
Buffer
0 min
3 min
6 min
9 min
Benedict
Nº 1
2,5
+
+
+
+
+
Nº 2
5,4
+
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